ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。
ELISA試劑盒的制備方法:
包括以下步驟:
1)抗原表位的計算機篩選;
2)抗原的制備;
3)血清的采集;
4)間接ELISA方法的建立;
5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗證;
6)試劑盒的穩定性驗證;
7)對屠宰場進行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強、穩定性合格、重復性好。應用本發明制得的試劑盒能有效檢出感染豬的戊型肝炎病毒,適用于大批量發病樣本的檢測,可用于豬戊肝的快速診斷,并預防、控制豬戊肝病毒的流行和阻斷戊肝病毒由豬向人傳播。
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大,